2024 Outeur: Elizabeth Oswald | [email protected]. Laas verander: 2024-01-13 00:02
Jy kan ook jou monster ontsout deur ultrafiltrasie tot 1 tiende van vorige volume, wat weer verdun en UF-stap herhaal. Die beste metode vir ontsouting is ontsouting deur gelfiltrering teen 50 mM buffer, as ultrafiltrasie (klassiek, nie sentrifugale nie).
Wat is ontsouting in proteïensuiwering?
Ontsouting word gebruik om soute uit proteïenoplossings, fenol of nie-geïnkorporeerde nukleotiede van nukleïensure of oortollige kruisbinding of etikettering van reagense van gekonjugeerde proteïene te verwyder.
Hoe suiwer jy proteïene?
In grootmaat-proteïensuiwering is 'n algemene eerste stap om proteïene te isoleer presipitasie met ammoniumsulfaat (NH4) 2SO4. Dit word gedoen deur toenemende hoeveelhede ammoniumsulfaat by te voeg en die verskillende fraksies van die gepresipiteerde proteïen te versamel. Vervolgens kan ammoniumsulfaat met dialise verwyder word.
Hoe buffer jy proteïene uit?
Buffer-uitruiling word egter uitgevoer deur eers te equilibreer met die kolomhars met die buffer waarin die monster moet beland. In beide gevalle sal die bufferbestanddele wat die monster dra in die kolom sal vervang word deur die oplossing waarmee die kolom vooraf geëquilibreer is.
Watter van die volgende chromatografietegnieke kan toegepas word vir die ontsouting van proteïene?
Soos hierbo genoem, kan gelfiltrasie effektief vir proteïen gebruik wordontsouting en word bewerkstellig deur eers die jelfiltrasiekolom met water te ewenaar. Bufferuitruiling word egter bewerkstellig deur eers die kolomhars met die teikenbuffer te ewenaar.
Aanbeveel:
Watter van die volgende is 'n funksie van chaperone-proteïen?
Definisie. Chaperone-proteïene, of molekulêre chaperones, is proteïene wat ander help om behoorlik te vou tydens of na sintese, om te hervou na gedeeltelike denaturasie, en om te translokeer na die sellulêre lokaliteite by waarin hulle woon en funksioneer.
By watter temperatuur denatureer proteïen?
Die smelttemperatuur verskil vir verskillende proteïene, maar temperature bo 41°C (105.8°F) sal die interaksies in baie proteïene verbreek en dit denatureer. Hierdie temperatuur is nie soveel hoër as normale liggaamstemperatuur nie (37°C of 98.
Hoekom 'n hoë-proteïen-lae-koolhidraat-dieet?
Hoë proteïen, lae koolhidraatdiëte kan gewigsverlies bevorder, spiermassa bewaar, bloedsuikerbeheer verbeter, jou risiko van hartsiektes verlaag en beengesondheid verbeter. Hoekom werk 'n hoë-proteïen-laekoolhidraat-dieet? Baie voedingskenners glo dat die hoë proteïeninhoud van laekoolhidraatdiëte die hoofrede vir hul doeltreffendheid is.
Hoe hidroliseer jy proteïen?
Proteïene word normaalweg gehidroliseer na samestellende aminosure deur gebruik te maak van 6N HCl-oplossing in "VERSEELDE" buise vir 24 uur. Aan die einde van hidrolise word suur verwyder deur verdamping onder vakuum. Byvoeging van 6% tioglikolsuur help om triptofaanreste teen volledige vernietiging tydens hidrolise te beskerm.
Hoe om stikstof uit proteïen te bereken?
Op grond van vroeë bepalings is gevind dat die gemiddelde stikstof (N)-inhoud van proteïene ongeveer 16 persent was, wat gelei het tot die gebruik van die berekening N x 6.25 (1/0.16=6.25)) om stikstofinhoud in proteïeninhoud om te skakel. Hoeveel stikstof is in 'n gram proteïen?
