Tripsinisering is die proses van sel-dissosiasie deur gebruik te maak van tripsien, 'n proteolitiese ensiem wat proteïene afbreek, om aanhangende selle te dissosieer van die vat waarin hulle gekweek word. Wanneer dit by 'n selkultuur gevoeg word, breek tripsien die proteïene af wat die selle in staat stel om aan die vat te kleef.
Waarom trypsiniseer ons selle?
Trypsinisasie word dikwels gedoen om toelating van die selle na 'n nuwe houer toe te laat, waarneming vir eksperimentering, of vermindering van die mate van samevloeiing in die fles deur die verwydering van 'n persentasie van die selle.
Hoe werk tripsien om selle los te maak?
Trypsien/EDTA is 'n gekombineerde metode om selle los te maak. Trypsien sny die adhesieproteïene in sel-sel en sel-matriks interaksies deur die aminosuur van die adhesieproteïene spesifiek by lisien of aginien op C-terminaal te sny as stroomop aminosuur nie prolien is nie.
Hoe kry jy getripsiniseerde aanhangende selle?
Prosedure
- Verwyder medium uit kultuurhouer deur aspirasie en was die monolaag met 'n soutoplossing vry van Ca2+ en Mg 2+ om alle spore van serum te verwyder. …
- Gee genoeg tripsien of tripsien/EDTA-oplossing in kultuurhouer(s) uit om die monolaag selle heeltemal te bedek en plaas in 37 °C broeikas vir ~2 minute.
Hoe deaktiveer ek tripsien in selkultuur?
Sodra selle los verskyn, voeg 2 volumes byvoorafverwarmde volledige groeimedium om tripsien te deaktiveer. Versprei die medium liggies deur 'n paar keer oor die sellaagoppervlak te pyp om herstel van >95% van selle te verseker. Vir serumvrye kulture, Sojaboon-tripsien-inhibeerder (Produk No.
