Die produk van beperkingsvertering kan maklik gestoor word by -20 C. By 4 C sal dit goed wees, maar om te verseker dat daar geen aktiwiteit en geen steraktiwiteit is nie aanbeveel om dit by -20 C te hou.
Hoe berg jy verteerde DNA?
Probeer om die jelskyf oornag in die yskas te stoor, of smelt selfs die sny in buffer en vries dit by -20°C of -80°C. Degradasie van die DNA sal teen dieselfde tempo en onder dieselfde toestande as oplosbare DNA plaasvind, dus gebruik 'n kouer temperatuur vir langer berging.
Wat beteken dit vir 'n plasmied om verteer te word?
Gesuiwerde plasmied-DNA word verteer met 1 of meer beperkingsensieme (REs) wat gekies is om 'n duidelike DNA-bandpatroon te gee wat maklik deur elektroforese opgelos word. … Beperkingsensieme wat binne die meervoudige kloningsplek (MCS) sny en lei tot 'n diagnostiese patroon van 2-5 bande wat maklik is om op te los, word tipies gekies.
Hoe berg jy gelineariseerde plasmiede?
As jy bekommerd is oor stroomaf-effekte van TE, stoor die DNA by 'n hoër konsentrasie en verdun wanneer nodig, of gebruik "lae TE" wat 10 mM Tris / is 0,1 mM EDTA. wanneer DNA of RNA skoon is, kan dit vir baie maande by -20C gestoor word sonder enige agteruitgang.
Hoe lank kan jy beperking-vertering hou?
Pro-Tip Afhangende van die toepassing en die hoeveelheid DNA in die reaksie, kan inkubasietyd wissel van 45 minute tot oornag. Vir diagnostiese vertering is 1-2 uur dikwels voldoende. Vir vertering met >1 µg DNA wat vir kloning gebruik word, word dit aanbeveel dat jy vir ten minste 4 uur verteer.
